一种大鼠肝癌干细胞的离心富集方法

作者：王兴; 刘卫辉; 夏宁; 张娟; 杨建栋; 王涛; 尤楠; 龚振斌; 季茹; 赵戈; 窦科峰

来源：中华实验外科杂志, 2012, (05): 857-860.

• 癌
• 肝细胞
• 干细胞
• 细胞分离 Carcinoma
• hepatocellular
• Stem cell
• Cell isolation

目的建立一种富集大鼠肝癌干细胞的方法,并检测此种方法分离得到的细胞是否具有肿瘤干细胞的生物学特征。方法二乙基亚硝胺(DENA)腹腔注射构建大鼠肝癌模型,两步胶原酶灌注法分离肝癌细胞并体外培养,Percoll连续梯度密度离心法将细胞分成4层,采用流式细胞仪检测各层细胞的肝癌干细胞表面标志上皮细胞黏附因子(EpCAM)、甲胎蛋白(AFP)的表达,并用实时-聚合酶链反应(Real-time PCR)验证EpCAM、CD133、AFP的mRNA表达。绘制生长曲线检测各层细胞增殖能力,Transwell小室检测各层细胞的侵袭能力。结果 Percoll离心所得4层细胞中,第3层细胞是富集肝癌干细胞最多的一...

• 单位
  西京医院; 第四军医大学