肝细胞核因子4α抑制胃癌中自噬的作用及其机制

作者：周仪; 李其兰; 郑丽端^*

来源：中华实验外科杂志, 2023, 40(02).

• 胃癌
• 肝细胞核因子4α
• 自噬
• 转录调控

目的探讨肝细胞核因子4α(HNF4A)对胃癌(GC)细胞自噬的调控作用及机制。方法人GC细胞株AGS(CRL-1739)、HGC-27(CL-0107)购自美国典型培养物保藏中心, GC细胞株分为空载体对照组、HNF4A过表达组、随机干扰组、HNF4A干扰组, 筛选稳定过表达/敲低HNF4A的亚克隆细胞株;采用实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)、蛋白质印迹法(Western blot)检测GC细胞中HNF4A的转录水平和蛋白表达变化;通过JASPAR分析寻找胃癌中HNF4A潜在靶基因;荧光成像检测细胞自噬通量变化;软琼脂克隆形成和基质胶侵袭检测细胞增殖及侵袭能力, 组间比较采用t检验。结果稳定过表达/敲低HNF4A的亚克隆细胞株, HNF4A组表达指标高于空载对照组(3.56±0.03比1.00±0.04, t=25.62, P<0.05), 敲低HNF4A组表达指标低于随机干扰组(0.27±0.04比1.00±0.03, t=21.53, P<0.05)。HNF4A过表达组自噬相关蛋白5(ATG5, 2.54±0.11比1.00±0.03, t=41.70, P<0.05)和自噬相关蛋白12(ATG12, 3.14±0.03比1.00±0.02, t=24.72, P<0.05)表达指标, 克隆形成数指标(386.00±14.42比144.00±11.14, t=23.00, P<0.05)和侵袭细胞数指标(391.70±9.50比144±11.14, t=29.30, P<0.05)均高于空载对照组;相反, HNF4A干扰组ATG5(0.28±0.05比1.00±0.02, t=20.32, P<0.05)和ATG12(0.31±0.07比1.00±0.05, t=18.93, P<0.05)表达指标, 克隆形成数指标(50.00±5.57比136.00±10.15, t=12.87, P<0.05)和侵袭细胞数指标(45.00±11.00比150.30±13.58, t=10.44, P<0.05)均低于随机干扰组。结论转录因子HNF4A调控自噬相关基因ATG5和ATG12表达, 促进胃癌细胞自噬。

• 单位
  华中科技大学同济医学院附属协和医院