带PTD的小鼠Foxp3 PRD缺失突变体对小鼠脾混合淋巴细胞反应的影响

作者：申卫红; 刘静; 彭鑫; 宗杨勇; 许逊; 邵启祥

来源：中南大学学报(医学版), 2009, (12): 1224-1230.

• 蛋白转导结构域
• ΔPRD
• Foxp3
• 融合蛋白 protein transduction domain
• ΔPRD
• forkhead box P3
• fusion protein

目的:构建和表达带蛋白转导结构域(protein transduction domain,PTD)的Foxp3(forkhead boxP3)PRD缺失突变体(PTD-ΔPRD)融合蛋白,并探讨其对脾混合淋巴细胞反应的影响。方法:应用PCR技术扩增获得小鼠ΔPRD片段核酸序列,将其分列插入到带PTD的pET28a-PTD和pET28a-PTD-eGFP原核表达载体中,并在大肠埃希菌Rosetta(DE3)中表达融合蛋白,利用镍柱获得并复性融合蛋白;Western印迹鉴定目的蛋白表达的正确性、流式细胞术和Western印迹检测融合蛋白穿膜进入小鼠T淋巴细胞瘤株EL-4细胞中的能力、双向混合淋巴细...

• 单位
  无锡市第三人民医院