人参皂苷Rg3对肝细胞癌上皮间质转化的抑制作用机制研究

作者：赵永军; 李刚刚^*; 孙治安

来源：中国临床药理学杂志, 2020, 36(14): 2066-2069.

DOI：10.13699/j.cnki.1001-6821.2020.14.043

• 人参皂苷Rg3
• 岩藻糖基转移酶Ⅳ
• 肝细胞癌
• 上皮间质转化
• 增殖
• 迁移
• 侵袭

目的探讨人参皂苷Rg3对肝细胞癌(HCC)上皮间质转化(EMT)的抑制作用及其作用机制。方法分别用4个不同浓度Rg3(0,0.1,0.5,1.0 mg·mL-1)处理HepG2细胞,分别命名为第1实验组、第2实验组、第3实验组和第4实验组;同时,将转染sh-NC、sh-FUT4、pcDNA3.1-NC、 pcDNA3.1-FUT4和pcDNA3.1-FUT4+0.5 mg·mL-1 Rg3的HepG2细胞命名为第1转染组至第5转染组。用蛋白质印迹法检测岩藻糖基转移酶IV(FUT4)在HCC细胞中的表达水平,用CCK-8检测各组中HepG2细胞的增殖水平,Transwell检测各组HepG2细胞的侵袭和迁移能力。结果 FUT4在3个HCC细胞系(Huh-7、HepG2和MHCC97-H)中的表达水平显著高于正常肝细胞HL-7702 (均P<0.05),其中FUT4在HepG2中的表达水平最高,因此选择HepG2细胞进行以下实验。第3转染组至第5转染组于72 h的增殖活性分别为0.90±0.11,1.52±0.11和0.88±0.11;这3组的侵袭细胞数目分别为72.18±12.88,125.93±15.62和68.88±17.51;这3组的迁移细胞数目分别为65.71±10.25,103.22±14.42和69.04±16.12,结果显示:过表达FUT4显著增加HepG2细胞迁移和侵袭能力,差异均有统计学意义(均P<0.05);在培养液中同时加入Rg3时,则能够逆转过表达FUT4的作用,差异也均有统计学意义(均P<0.05)。第3转染组至第5转染组的E-cadherin蛋白相对表达水平分别为1.00±0.13,0.76±0.08和0.97±0.15;这3组的N-cadherin蛋白相对表达水平分别为1.00±0.10,1.52±0.17和0.96±0.16;这3组的Vimentin蛋白相对表达水平分别为1.00±0.11,1.44±0.15和1.03±0.13,结果显示:过表达FUT4显著下调E-cadherin的表达水平,上调N-cadherin和Vimentin的表达;同时在培养液中加入Rg3时,能够逆转过表达FUT4的作用。以上结果表明,Rg3通过下调FUT4的表达抑制HepG2细胞增殖、迁移、侵袭和EMT。结论人参皂苷Rg3可作为肝癌治疗的药物,其机制是通过下调FUT4、抑制HepG2细胞增殖、迁移、侵袭和EMT。