摘要
目的 观察阻断ROCK信号通路对高糖诱导的血管平滑肌细胞(VSMC)炎症反应的调控作用,并探讨其与孤儿核受体Nur77表达的关系。方法 分离提取大鼠主动脉VSMC,将细胞随机分为对照组、法舒地尔组、高糖组、高糖+法舒地尔组,分别加入葡萄糖5.5 mmol/L、葡萄糖5.5 mmol/L+ROCK信号通路抑制剂法舒地尔50μmol/L、葡萄糖30 mmol/L、葡萄糖30 mmol/L+法舒地尔50μmol/L,作用12 h;采用Western blotting法检测细胞ROCK1、ROCK2、白细胞介素6(IL-6)、白细胞介素1β(IL-1β)、Nur77蛋白表达,实时荧光定量PCR法检测Nur77 mRNA表达。将VSMC随机分为Nur77高表达组和空白组,两组均加入葡萄糖5.5 mmol/L,Nur77高表达组同时加入Nur77激动剂Cytosporone B(CsnB)10μg/mL,作用12 h后比较其Nur77 mRNA及蛋白表达;更换培养基,加入葡萄糖30 mmol/L,作用12 h后比较其Nur77及IL-1β、IL-6蛋白表达。结果 高糖组细胞ROCK1、IL-1β、IL-6蛋白相对表达量均高于对照组(P均<0.05)。对照组、高糖+法舒地尔组、法舒地尔组细胞ROCK1、IL-1β、IL-6蛋白相对表达量比较,各组细胞ROCK2蛋白相对表达量比较差异均无统计学意义(P均>0.05)。高糖组细胞Nur77 mRNA及蛋白相对表达量均高于高糖+法舒地尔组、对照组、法舒地尔组(P均<0.05),高糖+法舒地尔组、对照组、法舒地尔组比较差异均无统计学意义(P均>0.05)。低糖环境下Nur77高表达组Nur77 mRNA及蛋白相对表达量均高于空白组,加入高糖后Nur77高表达组Nur77蛋白相对表达量高于空白组,IL-1β、IL-6蛋白相对表达量均低于空白组(P均<0.01)。结论 阻断ROCK信号通路和上调Nur77表达均可抑制高糖诱导的VSMC炎症反应,ROCK信号通路与Nur77表达之间可能存在一定的调控关系。
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单位河北医科大学第一医院