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摘要
目的：探讨鹿茸多肽CNT14促进口腔黏膜成纤维细胞（human oral mucosa fibroblasth,hOMF）增殖和迁移的作用和相关分子机制。方法：采用活/死细胞染色评价鹿茸多肽CNT14对hOMF细胞的生物安全性，CCK-8法检测鹿茸多肽CNT14对hOMF细胞增殖的作用，细胞划痕实验检测鹿茸多肽CNT14对hOMF细胞迁移的影响。采用蛋白质免疫印迹检测鹿茸多肽CNT14刺激后hOMF细胞内α-SMA、TGF-β1、Smad2和p-Smad2蛋白的情况；Smad2抑制剂对鹿茸多肽CNT14诱导成纤维细胞活化的影响。在新西兰大白兔体内构建角化龈缺损模型，取再生的牙龈组织进行H-E染色；免疫组织化学检测新西兰大白兔再生的牙龈组织中α-SMA、TGF-β1、Smad2和p-Smad2蛋白的表达量，补充验证鹿茸多肽CNT14促进口腔牙龈组织再生的能力。采用SPSS 20.0软件包对数据进行统计学分析。结果：活/死细胞染色实验中，鹿茸多肽CNT14处理hOMF细胞后，细胞存活率在95%以上。鹿茸多肽CNT14刺激hOMF细胞后，与对照组相比，增殖和迁移率显著增加（P<0.05）。鹿茸多肽CNT14刺激hOMF细胞后，细胞内α-SMA、TGF-β1、Smad2和p-Smad2蛋白表达量显著升高（P<0.05）。经Smad2抑制剂阻断鹿茸多肽CNT14诱导成纤维细胞后，细胞内α-SMA表达下降。动物实验中，H-E染色显示，CNT14处理组新西兰大白兔口腔黏膜创口的炎症反应比对照组轻。免疫组织化学染色结果显示，CNT14处理新西兰大白兔牙龈创口后第9天和第11天，再生的牙龈组织中α-SMA、TGF-β1、Smad2和p-Smad2表达量与对照组相比显著升高（P<0.05）。结论：鹿茸多肽CNT14对hOMF细胞具有良好的生物安全性，能促进口腔黏膜成纤维细胞增殖和迁移，细胞内α-SMA、TGF-β1、Smad2和p-Smad2蛋白表达量升高，有效促进牙龈组织再生。
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