慢病毒介导RNF2基因表达对食管癌细胞X线照射后增殖与迁移等影响

作者：刘志坤; 王璇; 张魏丽; 杨兴肖; 苏景伟; 祝淑钗

来源：中华放射肿瘤学杂志, 2017, 26(07): 810-815.

• RNF2基因
• 细胞增殖
• 细胞凋亡
• 细胞周期
• 食管癌细胞系

目的利用RNA干扰技术抑制人食管癌细胞中RNF2基因表达,观察其X线照射对细胞增殖活性、迁移能力、凋亡和细胞周期的影响。方法培养人食管癌细胞ECA-109,RT-PCR检测RNF2 mRNA水平表达;MTT法检测ECA-109食管癌细胞细胞增殖;蛋白印迹法检测ECA-109-R细胞中RNF2蛋白表达变化;流式细胞技术检测照射后不同时间细胞周期和凋亡变化。Transwell侵袭小室模型检测转染对食管癌细胞迁移能力的影响。重复测量设计资料方差分析。结果照射组食管癌细胞中RNF2在mRNA水平和蛋白表达水平均较未照射组明显增加(P<0.01),且存在剂量-效应关系;MTT结果显示食管癌细胞的增殖水平在照射后不同时间点均明显降低(P<0.01);ECA-109-R组细胞中BMI1、RNF2蛋白表达水平较ECA-109组和ECA-109-N组细胞明显降低(P<0.01),ECA-109组与ECA-109-N组比较差异无统计学意义(P>0.05);Transwell侵袭小室模型检测结果显示照射后3.5 h ECA-109-R组穿膜细胞数明显低于ECA-109组和ECA-109-N组(P<0.01)。6 Gy照射后各实验组处于G2+M期比例明显高于相应未照射组(P<0.01),且ECA-109-R组处于G2+M期的比例均明显低于照射后的ECA-109组和ECA-109-N组(P<0.05)。照射后ECA-109-R组细胞凋亡率明显高于ECA-109组和ECA-109-N组(P<0.01)。结论采用RNA干扰技术降低食管癌细胞中RNF2的表达,降低细胞增殖和迁移能力,解除照射后G2+M期阻滞,促进细胞凋亡,增加放射敏感性。

• 单位
  河北医科大学第四医院