人肠道α-防御素5促进辐照诱导小鼠肠道损伤的修复

作者：吴杰; 冉曦; 王涛; 王艾平^*

来源：陆军军医大学学报, 2023, 45(07): 606-613.

DOI：10.16016/j.2097-0927.202210237

• 辐照
• 放射性肠损伤
• 金属基质蛋白酶7
• 人α-防御素5

目的 观察辐照对C57小鼠肠道的损伤作用及人α-防御素5(human α-defensin 5,HD5)在其中的保护效应及功能。方法 基于C57小鼠构建肠道α-防御素敲除小鼠(MMP7-/-小鼠)模型，随后将HD5基因转入MMP7-/-小鼠，构建HD5转基因小鼠(HD5tg小鼠)模型。将实验分为野生型C57小鼠组(WT组)、MMP7-/-小鼠组和HD5tg小鼠组。利用5 Gy X射线(1.26 Gy/min)辐照各组小鼠后，统计分析30 d内小鼠生存状况，同时在0、2、10 d收取小鼠回肠组织。利用HE染色观察小鼠回肠病理损伤；TUNEL评估小鼠肠黏膜组织细胞凋亡；免疫荧光和PAS染色分析回肠肠道干细胞增殖、分化状态；Western blot检测TLR4、MyD88、NF-κB等蛋白表达；RT-qPCR检测肠黏膜IL-1、IL-6及IL-10等炎症因子转录水平。结果 成功构建并繁育MMP7-/-和HD5tg小鼠，WT组、MMP7-/-组、HD5tg组辐照后30 d小鼠生存率分别为50%(10/20)、35%(7/20)和55%(11/20),WT组和HD5tg组小鼠生存率显著高于MMP7-/-组(P<0.05),WT组和HD5tg组小鼠组间生存率无统计学差异。与MMP7-/-组相比，HD5转入后显著改善小鼠辐照后小肠绒毛和隐窝结构病理损伤；抑制肠黏膜细胞发生凋亡；促进肠道干细胞增殖、分化；抑制TLR4-MyD88-NF-κB信号通路活性，进而降低IL-1β、IL-6炎性因子表达水平(P<0.05)。结论 HD5通过改善辐照诱导的小鼠肠道上皮屏障功能障碍，促进肠黏膜细胞更新和组织修复，抑制炎性损伤，进而增强C57小鼠抗辐照能力。

• 单位
  中国人民解放军陆军军医大学; 第三军医大学