科研之友
微信
新浪微博
Facebook
分享链接
摘要
建立筛选小分子新型抗肿瘤药物Eg5抑制剂的方法。提取HL60细胞总RNA,通过RT-PCR获得cDNA,构建原核表达质粒并转化大肠杆菌诱导表达蛋白。通过两步离子交换层析纯化蛋白,对小分子化合物库里的300个化合物进行筛选。MTT法以及免疫组化用于分析化合物的抑制肿瘤细胞增殖作用的机制。测序证实克隆得到的hEg5序列完全正确,SDS-PAGE检测与预测的分子量完全吻合。对小分子化合物库的筛选结果显示有12个小分子能抑制Eg5的活力,这些分子比阳性药物monastrol抑制活力要好,比阳性药物CK0106023的抑制活力稍差,它们能抑制肿瘤细胞的增殖生长。CPUYL064和CPUYL001能在分裂的细胞中引发monastral spindle的现象。这些Eg5抑制剂很有可能在未来临床上发展成为新一代的抗肿瘤药物。
- 单位
