蓝氏贾第鞭毛虫α-4贾第素的原核表达及纯化

作者：王洋; 余源; 王卫亮; 陈阳; 慈雅丽; 田喜凤; 郑佳; 杨志宏

来源：中国人兽共患病学报, 2011, (06): 465-469.

• 蓝氏贾第鞭毛虫
• α-4贾第素
• 原核表达 α-4 giardin
• Giardia lamblia
• prokaryotic expression

目的原核表达并纯化蓝氏贾第鞭毛虫的α-4贾第素蛋白。方法经RT-PCR获得α-4贾第素基因片段,经双酶切连入原核表达载体pET-28a(+),构建成为重组表达载体pET-28a(+)-α-4,并转化大肠杆菌Rosetta(DE3)。IPTG诱导后,收集菌体,裂解后进行SDS-PAGE及Western blot检测,并用Ni-NTA亲和层析柱纯化融合蛋白。结果成功构建了原核表达载体pET-28a(+)-α-4,经IPTG诱导后,在大肠杆菌中高效表达,目的蛋白以包涵体形式存在;SDS-PAGE及Western blot分析显示,在相对分子量约34 kD的位置出现目的蛋白条带,与理论值相符;经Ni-...

• 单位
  华北理工大学