摘要
目的 :探讨蛇床子素对人急性B淋巴细胞白血病(B-cell acute lymphoblastic leukemia,B-ALL)697细胞的抗肿瘤作用及其可能的作用机制。方法 :不同浓度(8、16、32、64和128μmol/L)蛇床子素处理B-ALL697细胞后,采用CCK-8法检测细胞的增殖抑制率。8和32μmol/L蛇床子素处理B-ALL 697细胞后,采用FCM法检测细胞凋亡率,应用实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法检测凋亡相关分子Bcl-2和Bax mRNA及蛋白的表达。8和32μmol/L蛇床子素单独或联合自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-methyladenine,3-MA)处理B-ALL 697细胞后,进行单丹磺酰戊二胺(monodansylcadaverine,MDC)染色,FCM法检测细胞内平均荧光强度(meanuorescence intensity,MFI),以此反映B-ALL 697细胞的自噬情况;应用实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法检测自噬相关分子Beclin 1 mRNA及蛋白的表达。结果 :8、16、32、64和128μmol/L蛇床子素处理组B-ALL 697细胞增殖被明显抑制,且呈剂量和时间依赖性(P值均<0.05)。8和32μmol/L蛇床子素处理组B-ALL 697细胞凋亡率明显上升(P值均<0.01),凋亡相关分子Bax mRNA及蛋白表达水平明显升高,Bcl-2 mRNA及蛋白表达水平明显下降(P值均<0.05)。8和32μmol/L蛇床子素处理组B-ALL697细胞中MDC MFI明显增加(P值均<0.01),自噬相关分子Beclin 1 mRNA及蛋白表达水平均明显升高(P值均<0.05);3-MA联合蛇床子素处理组细胞内MDC MFI无明显变化,Beclin 1 mRNA及蛋白表达水平均无明显变化(P值均> 0.05)。结论 :蛇床子素通过抑制B-ALL 697细胞增殖,诱导细胞凋亡和自噬,发挥抗肿瘤作用。促凋亡机制可能与Bax表达上调和Bcl-2表达下调有关,Beclin 1参与了细胞自噬过程。
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