摘要
[目的]肌浆网钙泵抑制剂thapsigargin(TG)常被用于耗减肌浆网(sarcoplasmic reticulum,SR)的钙容量。本课题旨在探讨TG(100 nmol·L-1)对源自SR的胞内钙释放和SR钙容量耗减的时间效应以及SR内钙对SR钙释放的调节机理。[方法]局部场刺激作用于成年大鼠心肌细胞,使其产生动作电位,进而诱发胞内钙瞬变(action-potential-induced Ca2+ transients,ACT)。由ACT可估测胞内钙释放。SR钙容量可由咖啡因(20 mmol·L-1)诱发的钙瞬变(caffeine-induced Ca2+ transients,CCT)估测。实验结果用激光共聚焦显微镜系统记录。[结果]TG对ACT峰值(可衡量钙瞬变的大小)的时间效应如下:0 min,5.55±0.28(单位为标准钙荧光强度即F/F0,F0为静息钙荧光强度);10 min,4.89±0.36;17 min,2.58±0.38;25 min,2.11±0.19;35 min,2.22±0.17;50min,2.27±0.27。TG对CCT峰值的时间效应如下:0 min,6.73±0.17;10 min,6.60±0.59;17 min,6.24±0.44;25 min,3.99±0.28;35 min,2.24±0.37;50 min,1.14±0.01。以CCT为自变量,ACT为因变量的曲线呈“J”形。[结论]TG对心肌胞内钙释放和SR钙容量呈非线性的时间依赖效应。SR内钙部分耗减即可明显减少钙释放,说明SR内钙对胞内钙释放具有重要的调节作用。
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