穿膜肽介导p53抗原多肽致敏DC的体外抗瘤效应

作者：孙青山; 贾原; 张俊萍

来源：实用癌症杂志, 2015, 30(07): 949-957.

• 结肠癌
• 树突状细胞
• 细胞穿膜肽
• p53
• 肿瘤免疫治疗

目的探讨细胞穿膜肽(cpps)介导p53致敏树突状细胞(DC)获得细胞毒性T淋巴细胞(CTL),检测其体外对结肠癌细胞株的杀伤效果。方法抽取健康志愿者外周血50ml,用淋巴细胞分离液分离外周血单个核细胞,经细胞因子诱导,获得DC细胞和T淋巴细胞。将Tat49-57-p53264-272致敏DC细胞,待DC细胞成熟后与T淋巴细胞混合诱导产生CTL,并设PBS与P53为对照。流式细胞术检测致敏前后DC细胞的表型,并采用乳酸脱氢酶(LDH)法检测抗原肽疫苗致敏DC后获得CTL对结肠癌细胞株DLD1的体外杀伤活性,同时与人白血病细胞株jurkat的杀伤作用进行比较。结果致敏前DC中CD80、CD86表达率分别为(15.9±2.1)%、(19.1±2.3)%,而致敏后分别为(17.4±1.7)%、(18.7±1.1)%,致敏前后比较差异无统计学意义,P>0.05。实验组穿膜肽可延长p53抗原多肽在DC细胞内半衰期,从而增强与DC细胞质内的MHC I类分子的结合率,并提呈到细胞表面。实验组CTL对结肠癌DLD1细胞的杀伤能力显著强于对照组,且随着效靶比的增加,杀伤活性逐渐增强(P<0.05)。Tat49-57-p53264-272多肽致敏DC活化CTL对DLD1细胞具有特异性杀伤作用,对DLD1的杀伤作用显著强于jurkat细胞(P<0.05)。结论穿膜肽可以增强p53抗原多肽的免疫原性,Tat49-57-p53264-272多肽致敏DC能有效诱导抗结肠癌DLD1细胞的特异性免疫应答。

• 单位
  山西医科大学; 山西大医院