欧洲鳗鲡RIG-I基因的克隆、序列特征分析与原核表达

作者：李英英; 陈曦; 杨金先; 陈强; 宋铁英; 葛均青^*

来源：海洋渔业, 2022, 44(05): 513-520.

DOI：10.13233/j.cnki.mar.fish.20220805.001

• 欧洲鳗鲡
• RIG-I
• 克隆
• 序列特征分析
• 原核表达

为研究欧洲鳗鲡(Anguilla anguilla)RIG-I基因的特性，通过设计引物，扩增其序列，克隆至pCE2-TA/Blunt-Zero载体，测序验证后对所获得欧洲鳗鲡RIG-I基因序列进行生物信息学分析及原核表达。结果表明，欧洲鳗鲡RIG-I基因ORF序列有2 823 bp碱基，编码940个氨基酸，与日本鳗鲡(A.japonica)的序列同源性为96.71%;RIG-I蛋白属酸性亲水性蛋白，不存在跨膜结构，无信号肽，较不稳定，主要分布于细胞质中，有6个保守功能区；SDS-PAGE和western blot结果显示，实现了RIG-I基因在大肠杆菌中的高效表达，为后期制备RIG-I多克隆抗体和进一步探索RIG-I介导的天然免疫在鳗鲡抵御鳗鲡疱疹病毒(Anguillid herpesvirus, AngHV)侵染过程中的作用机制提供了研究基础。

• 单位
  福建省农业科学院