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摘要
目的:研究机械创伤是否能诱导皮肤成纤维细胞发生去分化。方法:建立体外培养细胞划痕损伤模型和体内全层皮肤损伤模型,应用免疫荧光染色、免疫组织化学、蛋白质印迹、转录组测序、si RNA等方法,检测机械创伤后成纤维细胞的形态、增殖情况、干细胞相关标志物的表达、集落形成能力、表达谱等的变化。结果:机械创伤后成纤维细胞逐渐变小变圆,发生类干细胞形态转变,并于创伤后36 h被激活而发生明显增殖,且创伤后成纤维细胞的激活不受创伤严重程度的影响。机械创伤后成纤维细胞中的干细胞标志物Sox2、波形蛋白的表达明显增强,集落形成能力也明显提高。体内实验也发现创面肉芽组织中出现大量Sox2阳性细胞。表达谱分析发现成纤维细胞的多能干细胞通路及相关调控分子表达明显增强。机械划痕后2 h创缘成纤维细胞中的总β-catenin和ser 675磷酸化的β-catenin的表达较对照组明显增强;应用β-catenin si RNA抑制成纤维细胞内的β-catenin表达后,机械创伤后创缘成纤维细胞中的Sox2阳性细胞几乎消失。结论:机械创伤可诱导皮肤成纤维细胞的去分化;β-catenin介导了机械创伤后成纤维细胞的去分化过程。
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单位创伤、烧伤与复合伤研究国家重点实验室; 第三军医大学
