RT-PCR方法检测贝类中诺沃克样病毒的研究

作者：张颖; 吴风亮

来源：食品科学, 2008, (05): 347-351.

• 诺沃克样病毒
• 反转录PCR
• 贝类
• 检测 Norwalk-like viruses
• RT-PCR
• shellfish
• detection

目的:本研究从病毒富集和核酸提取两方面进行探索,旨在建立一个反转录(RT)PCR技术检测贝类中诺沃克样病毒(NLVs)的方法。方法:利用脊髓灰质炎病毒作为参照毒株,优化了甘氨酸缓冲液-聚乙二醇(PEG)病毒浓缩方法;同时比较了异硫氰酸胍法、SDS-蛋白酶K法、Trizol-异丙醇法、试剂盒法四种RNA提取方法;对市售贝类样品进行了检测,并利用基因测序对阳性样品进行验证。结果:本研究采用的pH9.5甘氨酸缓冲液-16%聚乙二醇病毒浓缩法,病毒的回收率为16.8%,利用Trizol-异丙醇法提取RNA,检出限为8.1×102RT-PCR50/5g贝肉,实际检测贝类样品25件,其中3件样品为阳性,基...

• 单位
  中国环境管理干部学院; 河北农业大学