Cyclin Y和Cyclin X在肺癌细胞株A549中的细胞定位和功能

作者：周世杰; 江姝; 赵晓婷; 岳文涛

来源：中国肿瘤, 2013, 22(07): 570-574.

• Cyclin Y
• Cyclin X
• 肺癌
• 细胞定位
• 细胞增殖

[目的]构建CCNY和CCNX基因的真核表达载体并观察其在人肺癌细胞株A549中的表达及定位,为进一步探讨Cyclin Y、Cyclin X在肺癌中的细胞定位和功能奠定了基础。[方法]以人肺腺癌细胞株H1299cDNA为模板扩增CCNY和CCNX基因,并构建CCNY和CCNX过表达真核表达载体。应用荧光显微照相及Western Blot方法鉴定该细胞株中Cyclin Y、Cyclin X的定位及表达。[结果]成功构建pEGFP-N1/CCNY和pEGFP-N1/CCNX真核表达载体。荧光显微照相显示绿色荧光,Western Blot检测证实转染重组质粒细胞表达Cyclin Y、Cyclin X蛋白,Cyclin Y和Cyclin X分别定位于胞膜与胞核。A549-pEGFPN1细胞活性为1.31±0.03,而转染后的A549-CCNY pEGFPN1细胞活性为1.36±0.02,A549-CCNX pEGFPN1细胞活性为1.45±0.05(P<0.01)。[结论]Cyclin Y和Cyclin X在A549细胞株中定位具有明显的差异,而且胞浆定位的Cyclin X比细胞膜定位的Cyclin Y更能够促进A549细胞增殖。

• 单位
  首都医科大学附属北京胸科医院