ox-LDL诱导后SHP-2缺陷骨髓巨噬细胞脂肪沉积、吞噬功能及脂肪代谢基因表达观察

作者：梁雪雷; 马倩; 李新新; 谭鹤; 张雪; 帖彦清^*

来源：山东医药, 2019, 59(32): 20-24.

• 动脉粥样硬化
• 蛋白酪氨酸磷酸酶
• 巨噬细胞
• 泡沫细胞
• 脂肪代谢

目的观察氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导后SHP-2基因缺陷小鼠骨髓来源巨噬细胞(BMDM)脂肪沉积、吞噬功能及脂肪代谢相关基因表达的变化。方法以Lyz-2-Cre小鼠和SHP-2flox/flox小鼠杂交纯化后,繁育骨髓单核-巨噬细胞条件性SHP-2缺陷(SHP-2 MφCKO)小鼠(基因型SHP-2flox/flox)为实验组,以同窝野生型小鼠(基因型SHP-2+/+)为对照组。分离两组BMDM并给予ox-LDL刺激48 h后,透射电镜下观察BMDM脂滴沉积情况,用荧光显微镜照相,以红色荧光数量表示泡沫细胞形成情况;激光共聚焦显微镜观察BMDM对单分散荧光微球的吞噬情况,以绿色荧光强度表示BMDM的吞噬功能。ox-LDL刺激两组细胞24 h后采用Q-PCR法检测脂肪代谢相关基因CD36、TLR-4、SREBP-1c、SREBP-2、ABCA1、ABCG1 mRNA。结果繁育出Cre-小鼠36只,SHP-2 MφCKO小鼠53只,SHP-2+/+小鼠61只,SHP-2flox/+小鼠69只。实验组BMDM细胞质内红色和绿色荧光含量均高于对照组(P均<0.05)。实验组BMDM中CD36、TLR-4、SREBP-1c、SREBP-2 mRNA相对表达量高于对照组(P均<0.05)。结论 SHP-2基因缺陷小鼠BMDM脂肪沉积加剧,细胞吞噬功能增强,脂肪代谢相关基因表达上调。SHP-2基因缺陷加速泡沫细胞形成可能与增强ox-LDL内化进入巨噬细胞、增强胆固醇或脂质的转运有关。

• 单位
  河北北方学院; 河北省人民医院