毕赤酵母展示海藻糖合成酶及其性质研究

作者：盛敏; 谢定; 文李; 焦玲; 姜博; 方芳; 刘雄赳

来源：食品与生物技术学报, 2016, 35(01): 59-65.

• 海藻糖合成酶
• 毕赤酵母
• 全细胞催化剂酶学性质

利用毕赤酵母表面展示天蓝色链霉菌(Streptomyces coelicolor)海藻糖合成酶(Trehalose synthesase,TS,EC 5.4.99.16)并研究其酶学性质。人工合成酵母内源壁蛋白(GPI-modified wall proteins,GCW14)与天蓝色链霉菌海藻糖合成酶组合DNA(GCW14-TS),将其亚克隆到pPIC9k载体后转化到GS115酵母菌中,成功构建了pPIC9k-GCW14-TS载体,并将TS展示在毕赤酵母GS115表面,然后对其酶学性质进行研究。发现其在3045℃温度范围都能发挥作用,最适pH为8.5,K+、Mg2+等金属离子对其有促进作用且重复使用5次后仍然可以保持75%以上的酶活性。该基因工程菌具有海藻糖合成酶固定化酶性质,可用于将麦芽糖转化为海藻糖的产业化生产。

• 单位
  生物工程学院; 长沙理工大学