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摘要
目的·探究α-倒捻子素（α-mangostin,AM）对超氧化物歧化酶1 （superoxide dismutase 1,SOD1）突变型肌萎缩侧索硬化（amyotrophic lateral sclerosis,ALS）的干预作用及可能的机制。方法·通过试剂盒检测小胶质细胞ATP水平变化，探究AM对SOD1聚集体处理的小胶质细胞（SOD1-ALS小胶质细胞模型）能量平衡的调控作用。通过Western blotting检测AMP活化蛋白激酶（AMP-activated protein kinase,AMPK）及其代谢调节通路中关键分子肝脏激酶B1和PPARγ协同激活因子-1α的激活水平，探究AM对疾病状态小胶质细胞AMPK通路的调控作用。通过化合物C抑制AMPK激活后检测ATP变化，探究AMPK在AM调控疾病状态小胶质细胞能量平衡中的作用。抑制AMPK激活的同时通过ELISA检测SOD1-ALS小胶质细胞对SOD1的摄取率和降解率，探究AMPK介导的能量调控在AM调节SOD1-ALS小胶质细胞清除SOD1中的作用。通过Western blotting和免疫荧光检测探究AM对疾病状态小胶质细胞自噬的作用及自噬在AM调节小胶质细胞降解SOD1中的作用。通过制备纳米颗粒包载的AM （NPAM）实现AM的体内给药。通过尾静脉注射的方式对SOD1*G93A ALS模型小鼠连续给予NPAM 30 d,1次/d。通过免疫组织化学染色检测NPAM给药后ALS小鼠腰段脊髓SOD1蛋白的聚集情况，通过尼氏染色和NeuN免疫组织化学染色检测神经元的损伤和丢失程度，通过转棒实验和后肢握紧实验评价ALS小鼠的运动能力，通过记录体质量和生存期评价ALS小鼠的疾病进程。结果·AM恢复了疾病状态小胶质细胞的ATP水平，增强了其对SOD1聚集体的摄取和通过自噬的降解；抑制AMPK通路后，AM的这些作用消失。NPAM减少了SOD1*G93A ALS模型小鼠腰段脊髓SOD1聚集体，减少了腰段脊髓神经元的损伤和丢失，还缓解了ALS小鼠的运动损伤和体质量丢失。结论·AM通过AMPK介导的能量平衡恢复作用增强了SOD1-ALS小胶质细胞模型对SOD1聚集体的清除，并显著改善了ALS模型小鼠的神经病理变化及疾病症状。
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