水牛cMyc基因与穿膜肽TAT的融合表达

作者：刘庆友; 伏彭辉; 刘金凤; 邓彦飞; 蒋如明; 石德顺

来源：中国兽医科学, 2011, (01): 65-69.

DOI：10.16656/j.issn.1673-4696.2011.01.001

• 水牛
• cMyc基因
• TAT
• 融合表达 buffalo
• cMyc gene
• TAT
• fusion expression

为探讨干细胞转录因子与穿膜肽融合表达蛋白对水牛体细胞诱导重编程的可行性,作者对影响水牛cMyc基因穿膜肽融合蛋白表达的因素进行了探索。应用双酶切定向克隆的方法,将水牛cMyc基因CDS(1 350bp)连接到pET-HA2-TAT载体中,构建成pET-cMyc-TAT载体,经酶切、PCR和测序验证,载体构建正确。将pET-cMyc-TAT载体转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,经IPTG诱导目的蛋白表达,同时探索了其表达形式、诱导表达IPTG最优浓度和最优时间以及蛋白纯化咪唑洗脱的最佳浓度。结果表明,融合蛋白cMyc-TAT在37℃以包涵体的形式大量表达,IPTG终浓度0.001mmol...

• 单位
  西南大学荣昌校区; 广西大学