白芥子提取物通过调控lncRNA CASC2的表达影响宫颈癌细胞增殖、迁移、侵袭的实验研究

作者：金璇; 周鹤峰^*

来源：中药材, 2020, 43(12): 3029-3034.

DOI：10.13863/j.issn1001-4454.2020.12.034

• 白芥子
• CASC2
• 宫颈癌
• 增殖
• 迁移
• 侵袭

目的：分析白芥子提取物对HeLa细胞增殖、迁移与侵袭的作用及可能机制。方法：用终浓度分别为20、40、80μg/mL的白芥子提取物培养HeLa细胞，作为白芥子各浓度组，以未经任何处理的HeLa细胞作对照组。将pcDNA3.1、pcDNA3.1-CASC2、si-NC、si-CASC2分别转染至正常培养的HeLa细胞中，记为pcDNA3.1组、pcDNA3.1-CASC2组、si-NC组、si-CASC2组；再将转染si-NC、si-CASC2的细胞用终浓度为80μg/mL的白芥子提取物培养，记为白芥子+si-NC组、白芥子+si-CASC2组。蛋白质印迹(Western blot)检测细胞周期素D1(CyclinD1)、细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂1A(P21)、上皮钙黏蛋白(E-cadherin)、基质金属蛋白酶2(MMP-2)表达；四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)试剂盒检测细胞活力；Transwell检测细胞迁移和侵袭；实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测癌症易感候选基因2(CASC2)和miR-18b-5p表达；荧光素酶报告实验检测CASC2和miR-18b-5p的靶向关系。结果：与对照组比较，不同浓度白芥子组HeLa细胞Cyclin D1、MMP-2蛋白表达显著降低，P21、E-cadherin蛋白表达显著升高，细胞活力及迁移、侵袭细胞数显著降低(P<0.05),且白芥子提取物的作用呈浓度依赖性。白芥子处理的HeLa细胞中CASC2高表达，miR-18b-5p低表达。与pcDNA3.1组比较，pcDNA3.1-CASC2组HeLa细胞Cyclin D1、MMP-2蛋白表达显著降低，P21、E-cadherin蛋白表达显著升高，细胞活力及迁移、侵袭细胞数显著降低(P<0.05)。抑制CASC2表达可逆转白芥子对HeLa细胞增殖、迁移和侵袭的抑制作用。CASC2靶向调控miR-18b-5p。结论：白芥子提取物可抑制宫颈癌细胞增殖、迁移和侵袭；其机制可能与调节CASC2、miR-18b-5p表达有关。

• 单位
  遵义医科大学