基于PI3K/Akt/mTOR通路探讨甘松新酮对H9c2心肌细胞低氧损伤的保护作用

作者：李红艳; 梅显运; 杨慧雅; 李艺康; 冯佩; 孙芳云

来源：中国比较医学杂志, 2023, 33(07): 41-47.

• 甘松新酮
• 心肌细胞
• 低氧损伤
• 凋亡
• 自噬
• PI3K/Akt/mTOR通路

目的 探讨甘松新酮(nardosinone, Nar)通过调控PI3K/Akt/mTOR通路对低氧诱导H9c2心肌细胞凋亡的影响及机制。方法 采用氯化钴(CoCl2)制备心肌细胞低氧损伤模型，CCK-8试剂盒检测细胞活性；Hoechst 33342进行细胞染色，激光共聚焦显微镜下观察细胞凋亡现象；网络药理学预测Nar治疗IHD相关信号通路；Western blot检测凋亡、自噬和PI3K/Akt/mTOR通路相关蛋白表达。结果 PI3K/Akt/mTOR通路是Nar治疗IHD关键信号通路之一；与对照组比，CoCl2(400μmol/L)组细胞活性降低，细胞核碎片增多，凋亡蛋白Cleaved-Caspase-3表达升高、Bcl-2/Bax比降低，PI3K、Akt和mTOR磷酸化水平降低；P62表达降低，LC3II/LC3I比和Beclin-1表达升高(P<0.05)。与CoCl2组比，Nar(50μmol/L)预处理显著增加了细胞活性、减少细胞核凋亡碎片，降低Cleaved-Caspase-3表达，升高Bcl-2/Bax比值，增加了PI3K、Akt和mTOR磷酸化水平及P62表达，降低LC3II/LC3I比和Beclin-1表达(P<0.05)。PI3K特异性抑制剂LY294002预作用后抵消了Nar对CoCl2引起的以上凋亡、PI3K/Akt/mTOR通路相关蛋白和P62蛋白的影响，但没有抵消对LC3II/LC3I比和Beclin-1表达的影响。结论 Nar激活PI3K/Akt/mTOR通路抑制了CoCl2诱导的H9c2心肌细胞低氧凋亡，但可能通过其他途径缓解了过度自噬对细胞造成的损伤。

• 单位
  西藏民族大学