摘要
目的 探讨微小RNA-433-3p(miR-433-3p)靶向Ras相关蛋白1A(RAP1A)调控结直肠癌细胞增殖、凋亡、迁移与侵袭的作用及机制。方法 采用实时荧光定量PCR(qPCR)检测结直肠癌细胞的miR-433-3p水平。向SW480细胞转染miR-433-3p模拟物mimics(miR-433-3p mimics组)或无义序列(NC组),另将miR-433-3p mimics和RAP1A过表达质粒共转染SW480细胞(miR-433-3p mimics+RAP1A组),采用CCK-8法、流式细胞术、划痕实验和Transwell小室实验评估SW480细胞的增殖、凋亡、迁移和侵袭情况。双荧光素酶报告基因实验分析miR-433-3p和RAP1A间的靶向关系。qPCR和Western blotting法检测RAP1A、Bax、Bcl-2和基质金属蛋白酶(MMP)-2的mRNA和蛋白水平。结果 SW480、HCT116和LoVo细胞的中miR-433-3p水平低于Caco-2细胞(P<0.05)。RAP1A是miR-433-3p的作用靶点且miR-433-3p能够抑制SW480细胞中RAP1A的表达。与NC组相比,miR-433-3p mimics组SW480细胞增殖、迁移和侵袭能力减弱且凋亡增加并伴有Bcl-2和MMP-2水平降低和Bax水平升高(P<0.05)。相较于miR-433-3p mimics组,miR-433-3p mimics+RAP1A组SW480细胞增殖、迁移和侵袭能力增强且细胞凋亡降低并伴有Bcl-2和MMP-2水平升高和Bax水平降低。结论 结直肠癌中miR-433-3p表达下调且发挥抑癌基因的作用,miR-433-3p/RAP1A轴有望成为结直肠癌的潜在治疗靶点。
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单位西安医学院附属宝鸡医院