摘要

从蛹虫草Cordyceps militaris小麦培养基残渣中分离和鉴定虫草素,并进行了体外人肝癌细胞Hep G2(human hepatoma cell line,Hep G2)的抑制作用研究。以蛹虫草小麦培养基为原料,研究热超声水提取,探究pH值、温度、浸提时间、超声功率对虫草素的提取效果,用苯乙烯型弱极性大孔吸附树脂(AB-8)柱层析分离、重结晶纯化虫草素,并用高效液相色谱法(high performance liquid chromatography,HPLC)、红外光谱法(infrared spectroscopy,IR)鉴定。虫草素处理肝癌细胞Hep G2后,倒置相差显微镜下观察肝癌细胞形态变化,并用四甲基偶氮唑蓝(methylthiazolyltetrazolium,MTT)法测定细胞生长情况。结果表明:热超声水提取工艺为:固液比1:50、pH值6、温度60 ℃、浸提时间3 h、超声功率300 W时提取效果好。经鉴定,分离提取物为虫草素,纯度达到99%以上。不同浓度的虫草素对肝癌细胞Hep G2有明显的抑制作用,且与虫草素浓度和作用时间呈正相关,被抑制的细胞凝集、变圆、碎裂增加。本提取工艺得到的虫草素纯度高,简单易扩大,且对肝癌细胞增殖作用具有明显的抑制作用,为其在功能性食品添加剂方向的应用提供了数据基础。