摘要

目的构建Tmub1基因的过表达慢病毒载体(LV-Tmub1),为研究Tmub1蛋白在肝细胞增殖过程中的作用提供实验材料。方法化学合成Tmub1基因序列,用BamHI/AgeI酶切化学合成含有目的基因的质粒及GV287载体,PCR产物连接入线性化表达的载体。PCR鉴定引物,再对PCR鉴定阳性的克隆进行DNA测序和比对分析。使用构建的LV-Tmnb1,转染293T细胞,荧光法检测构建的慢病毒滴度。结果成功构建了LV-Tmub1,并获得相应的病毒,病毒滴度为2×108 TU/mL。结论LV-Tmub1为进一步研究Tmub1蛋白在肝细胞增殖中的作用提供了实验基础。