猪捷申病毒3D蛋白的原核高效表达及其反应活性

作者：吴波平; 冯力; 时洪艳; 陈建飞; 孙东波; 高秀春; 白兴华

来源：中国兽医科学, 2007, (02): 131-134.

DOI：10.16656/j.issn.1673-4696.2007.02.009

• 猪捷申病毒
• 3D基因
• RNA依赖的RNA聚合酶
• 原核表达 porcine teschovirus
• 3D gene
• RNA-dependent RNA polymerase
• prokaryotic expression

根据猪捷申病毒(PTV)Swine/CH/IMH/03株核苷酸序列,设计了1对特异性引物,以全长基因组重组质粒pSK-PTVFL为模板扩增了3D基因,并将扩增产物定向克隆到原核表达载体pET30a(+)中,阳性质粒转化BL21(DE3),阳性菌经0.3 mmol/L IPTG诱导后,进行Western-blotting检测。结果显示,3D蛋白获得了高效表达,表达量占菌体总蛋白的66.1%,且重组蛋白能与PTV Swine/CH/IMH/03株阳性血清发生特异性反应。表明,3D蛋白能在大肠杆菌中高效表达,并具有良好的免疫原性,这为开发相应的鉴别诊断技术奠定了基础。

• 单位
  中国农业科学院哈尔滨兽医研究所; 东北农业大学; 兽医生物技术国家重点实验室; 生命科学学院