融合酰基载体蛋白可增强大肠杆菌重组蛋白的可溶性和热稳定性

作者：刘延娟; 李旭娟; 袁航; 刘娴; 高艳秀; 龚明; 邹竹荣

来源：中国生物工程杂志, 2017, 37(07): 115-123.

DOI：10.13523/j.cb.20170718

• 酰基载体蛋白
• 酸性融合标签
• 重组蛋白
• 可溶性
• 热稳定性

目前,蛋白质可溶性和热稳定性已成为重组蛋白高效生产、功能应用和长久保存不可回避的问题,而使用酸性蛋白融合标签可能是其有效解决策略。酰基载体蛋白(ACP)是脂肪酸生物合成途径的必要组分,在大肠杆菌中为一个高度酸性的小分子多肽。将大肠杆菌ACP与几个热不稳定的靶蛋白[如小桐子抗坏血酸过氧化物酶1(Jc APX1)、大豆核酮糖-1,5-二磷酸羧化/加氧酶的活化酶2(GmRCA2)、大肠杆菌高丝氨酸O-转琥珀酰酶(EcMetA)]进行基因融合并使其在大肠杆菌中诱导表达,发现ACP融合能显著增强这些重组靶蛋白的可溶性。另外,对重组蛋白的热处理和酶活性分析发现,融合ACP还能极大提高这三个靶蛋白的热稳定性,并有效保护JcAPX1酶活免遭热失活,使其耐热性提高了至少2℃。ACP的这种效果推测可能与其高酸度特性有关,可以作为一个新的功能酸性融合标签。

• 单位
  生命科学学院; 云南省农业科学院甘蔗研究所; 云南师范大学