丙烯腈致大鼠肝细胞损伤中PI3K/AKT信号通路的作用

作者：郑爱; 赵粉线; 石影; 郑蓉; 党瑜慧; 李芝兰^*

来源：生态毒理学报, 2023, 18(02): 346-355.

• 丙烯腈
• 大鼠
• 细胞凋亡
• PI3K/AKT信号通路
• 肝细胞

为探讨丙烯腈(acrylonitrile, ACN)致大鼠肝细胞损伤中PI3K/AKT信号通路的作用，随机将60只雄性SD大鼠分为5组：对照组，ACN低、中、高剂量染毒组和干预组。分别给予玉米油，11.5 mg·kg-1、23.0 mg·kg-1、46.0 mg·kg-1 ACN和300 mg·kg-1 N-乙酰基半胱氨酸(NAC)+46.0 mg·kg-1 ACN灌胃染毒，灌胃容积为5.0 mL·kg-1,1次·d-1,6 d·周-1,共28 d。最后一次染毒1 d后，大鼠麻醉心脏采血后处死，取肝脏进行实验。(1)原位末端标记法(TUNEL)观察肝细胞凋亡水平；(2)定量逆转录聚合酶链反应法(qRT-PCR)检测pi3k、akt、bad、bcl-2、cyt c和caspase-3基因表达水平；(3)免疫印迹法(WB)检测PI3K/AKT信号通路和线粒体凋亡通路相关蛋白的表达水平。研究表明：(1)细胞凋亡方面。ACN低、中剂量组凋亡细胞较对照组显著增多(P<0.05)。(2)mRNA相对表达水平方面。与对照组相比，ACN低剂量组bad、caspase-3显著升高(P<0.05),bcl-2显著降低(P<0.05);ACN中剂量组pi3k、bcl-2降低(P<0.05),cyt c升高(P<0.05);ACN高剂量组pi3k、bcl-2降低，bad升高(P<0.05);ACN各剂量组akt无显著差异(P>0.05);NAC组bad较ACN高剂量组降低(P<0.05)。(3)蛋白相对表达水平方面。与对照组相比，ACN低剂量组pro-Caspase-3降低，cleaved-Caspase-3升高(P<0.05);ACN中剂量组PI3K、p-Bad和pro-Caspase-3降低，Caspase-9、Bad、Bax和Cyt c升高，Bcl-2/Bax值降低(P<0.05);ACN高剂量组p-PI3K、p-AKT、Bcl-2、p-Bad和pro-Caspase-3降低，Bad、Bax、Caspase-9、Cyt c和cleaved-Caspase-3升高，Bcl-2/Bax值降低(P<0.05);ACN各剂量组AKT无显著差异(P>0.05)。与ACN高剂量组相比，NAC组PI3K、p-Bad和pro-Caspase-3升高，Bax、Caspase-9和cleaved-Caspase-3降低(P<0.05)。ACN抑制PI3K/AKT信号通路及激活线粒体凋亡途径可能是大鼠肝细胞损伤的原因之一。

• 单位
  公共卫生学院; 兰州大学