实时荧光定量PCR检测斑点热立克次体方法的建立

作者：罗婉蓉; 刘伯玉; 陈振; 任翠平; 高越; 杨莉; 朱禹; 余东阳; 柳燕^*

来源：安徽医科大学学报, 2020, 55(07): 1008-1013.

DOI：10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2020.07.005

• 斑点热立克次体
• ompA
• TaqMan探针
• 实时荧光定量PCR

目的建立斑点热群立克次体(SFGR)TaqMan实时荧光定量PCR(qPCR)快速检测方法。方法根据日本斑点热立克次体外膜蛋白A(ompA)基因序列设计特异性引物和探针,建立基于TaqMan探针的实时荧光定量PCR检测方法,对其特异性、灵敏性、重复性进行检测,用建立的此检测方法和常规的巢式PCR方法同时对临床收集的80份患者血标本进行检测并比较两者结果。结果成功建立了检测SFGR的实时荧光定量PCR方法,标准曲线的循环阈值与模板拷贝数均呈良好的线性关系(r>0.99),且在检测SFGR核酸样本时具有良好的灵敏度、特异性和重复性。结论该研究建立了基于TaqMan探针检测SFGR的实时荧光定量PCR检测方法,为临床实验室快速确诊SFGR疾病提供了快速、有效的技术手段。

• 单位
  安徽医科大学