摘要
目的:检测microRNA-1247(miR-1247)在骨肉瘤细胞系中的表达及对骨肉瘤细胞增殖和凋亡的影响和机制。方法:采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)测定miR-1247在人正常成骨细胞系(U2OS、Saos-2、143B)及人骨肉瘤细胞系(h FOB1.19)中的表达,将Saos-2细胞系分成两组,即miR-1247过表达组(miR-1247组)和阴性对照组(EV组),采用LipofectamineTM2000分别转染miR-1247 mimics和阴性对照序列scramble,采用MTT法和流式细胞术测定增殖和凋亡,Western blot检测SOX9和FAM129B的表达。结果:miR-1247在骨肉瘤细胞系中的相对表达量低于人正常成骨细胞系,差异有统计学意义(P <0.05)。转染后0、1、3 d,EV组与miR-1247组细胞增殖水平差异无统计学意义(P> 0.05);转染后5、7 d,miR-1247组细胞增殖水平低于EV组,差异有统计学意义(P <0.05)。miR-1247组细胞凋亡率高于EV组,差异有统计学意义(P <0.01)。miR-1247组SOX9和FAM129B蛋白表达量低于EV组,差异有统计学意义(P <0.05)。结论:miR-1247在骨肉瘤细胞系中低表达,miR-1247上调表达可抑制细胞增殖并诱导凋亡,其机制可能与SOX9和FAM129B蛋白下调表达有关。
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单位同济医学院附属武汉中心医院; 华中科技大学