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摘要
目的:探讨人脐带血来源的单个核细胞(h UC-MNC)，经两种体外培养体系活化扩增后的人脐带血自然杀伤细胞(h UC-NK)在生物学表型和细胞毒性上的异同。方法:收集健康供者捐赠的脐带血，经淋巴细胞分离液介导的密度梯度离心法富集单个核细胞。基于本课题组近期建立的3因子体系(定义为“3IL”)，比较Miltenyi和XVIVO 15两种培养基体外培养14 d后NK细胞(分别定义为M-NK和X-NK)的细胞表型、细胞亚群、细胞活力及细胞毒功能的相似性和差异性。结果:经上述2种体系诱导14 d后，总CD3-CD56+NK细胞比例由4.25%±0.04%(d 0)提高至71%±0.18%(M-NK)和75.2%±1.1%(X-NK)。与X-NK组相比，M-NK组CD3+CD4+T和CD3+CD56+NKT细胞比例显著降低。X-NK组中表达CD16、NKG2D、NKp44、CD25活化型标志物的细胞比例更高，但M-NK组总NK细胞扩增数量为X-NK组的2倍。两组在NK细胞增殖及细胞周期上无统计学差异，M-NK组的Annexin V+凋亡细胞比例低于X-NK组。NK细胞与K562细胞体外共培养杀伤实验显示，在相同效靶比(E∶T)下，M-NK组CD107a+NK细胞的比例更高，杀伤效率亦略优于X-NK组(P <0.05)。结论:两种体外扩增活化体系均可诱导产生高活化水平的h UC-NK，但二者在生物学表型和肿瘤杀伤毒性等多个方面存在差异。
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