摘要

目的通过建立异基因骨髓移植(BMT)联合胸腺上皮细胞移植(TCT)小鼠模型,探讨TCT应用于BMT的可行性及其效应。方法以BALB/C小鼠为受鼠,C57BL/6小鼠为供鼠,移植前1 d对受鼠进行全身照射预处理,BMT后取C57BL/6孕鼠胚胎期14~16 d胎胸腺上皮细胞进行TCT。为了分析合适的全身照射剂量,将接受不同全身照射剂量的受鼠分为3组:7 Gy组、6.5 Gy组和6 Gy组。为了分析胸腺上皮细胞植入情况,以接受BMT联合供鼠来源TCT的受鼠作为实验组,以单纯接受BMT的受鼠作为对照组,每组8只。采用活体成像检测分析胸腺上皮细胞植入情况,测定胸腺指数,取各组受鼠胸腺进行组织学检查及观察胸腺上皮细胞表面标记分子K8、K5免疫荧光抗体染色情况,应用流式细胞仪检测各组受鼠移植4周后外周血T淋巴细胞亚群。结果接受6.0 Gy剂量的受鼠能够长期存活但植入失败,照射剂量6.5 Gy时受鼠的存活率降低但BMT和TCT皆植入成功,表明6.5 Gy是最小致死剂量,作为建立模型的全身放疗剂量。活体成像检测显示,移植后2周实验组受鼠前胸部皮下可检测到明显的荧光信号,对照组受鼠未检测到任何荧光。移植4周,实验组受鼠的胸腺单叶明显比对照组单叶体积大,且胸腺指数也较高。组织学观察显示,嵌合了异基因TEC的受鼠胸腺具有典型的胸腺皮质和髓质结构,且明显表达K8+和K5+胸腺髓质上皮细胞。移植4周后,实验组CD4+和CD8+T淋巴细胞比例均明显高于对照组(P<0.05)。结论胸腺上皮细胞可植入异基因BMT受鼠胸腺内,并促进受鼠外周免疫T淋巴细胞数量的重建。