双重检测马铃薯X和Y病毒试纸条制备技术研究

作者：张微; 李志新; 赵雪; 张金鹏; 付春江; 于倩倩; 刘卫平

来源：作物杂志, 2021, (06): 62-66.

DOI：10.16035/j.issn.1001-7283.2021.06.010

• 马铃薯X病毒
• 马铃薯Y病毒
• 双重检测试纸条

为了实现在马铃薯种薯生产田现场同时快速检测马铃薯X(PVX)和Y病毒(PVY),利用胶体金标记和免疫层析技术研制了PVX-PVY双重检测试纸条。采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金溶液,在波长526nm处有最大吸收值,金颗粒直径约25nm。同时标记PVX和PVY兔多克隆抗体,将抗体标记物喷射于玻璃纤维纸上,作为金标垫。将PVX和PVY抗体分别划线于硝酸纤维素膜上作为检测线,将羊抗兔抗体划线于硝酸纤维素膜上作为质控线,制备胶体金试纸条。结果表明,研制的双重试纸条能够在2min之内同时检出PVX和PVY。PVX病汁液检测稀释限度可达106倍(W/V),PVY可达105倍(W/V),其中对PVX检测更灵敏。用其他4种常见病毒(PVS、PLRV、PVA和PVM)检测,未出现交叉反应。在田间采集马铃薯叶片,分别利用试纸条与DAS-ELISA检测,结果一致性非常高。由此可知,该试纸条具有操作简便、反应快捷的特点,特别适用于田间及口岸一线对于马铃薯X和Y病毒的同时检测。

• 单位
  黑龙江省农业科学院