经鼻腔移植人脐带间充质干细胞修复新生大鼠缺氧缺血性脑损伤

作者：杨汉华; 田树凤; 谢丽春; 陈运彬^*; 马廉^*

来源：中国组织工程研究, 2019, 23(21): 3386-3391.

DOI：10.3969/j.issn.2095-4344.1762

• 干细胞
• 脐带干细胞
• 间充质干细胞
• 脐带间充质干细胞
• 移植
• 缺氧缺血性脑损伤
• 鼻腔给药
• 水迷宫实验

背景:动物实验显示人脐带间充质干细胞移植具有显著的神经保护作用,其移植途径包括经静脉、动脉、腰穿、脑立体定向移植和侧脑室移植多种,均存在不足。目的:探讨通过鼻腔移植人脐带间充质干细胞修复新生大鼠缺氧缺血性脑损伤的可行性和有效性。方法:取90只7 d龄SD大鼠(汕头大学医学院实验动物中心提供),随机分3组,每组30只:假手术组分离左颈总动脉后缝合皮肤;模型组采用结扎切断左颈总动脉联合缺氧仓的方法中制备缺氧缺血性脑损伤模型;实验组采用同样方法制备缺氧缺血性脑损伤模型,同时鼻腔滴入绿色荧光蛋白标记的人脐带间充质干细胞。建模后3 d取脑组织,进行尼氏染色、TUNEL染色及免疫荧光染色;建模后14,29 d,水迷宫实验检测大鼠记忆、学习能力,14d水迷宫实验完成后行脑组织TUNEL染色。动物实验经深圳大学医学部实验动物伦理委员会批准(伦理批准号:2016-121)。结果与结论:①尼氏染色:模型组大脑皮质及海马CA1区神经元排列均不规则,尼氏小体数量少;实验组大鼠大脑皮质及海马CA1区神经元排列较模型组规则,尼氏小体数量较多;②TUNEL染色:建模后3,14 d,模型组凋亡细胞数多于假手术组(P <0.05),实验组凋亡细胞数少于模型组(P <0.05);③免疫荧光染色:实验组脑组织中可见绿色标记的人脐带间充质干细胞,主要分布于损伤侧海马及大脑皮质区域,非损伤侧脑组织偶可见绿色标记细胞,未见绿色荧光与GFAP或NSE染色双阳性细胞;④实验组建模后14,29 d的平均逃逸潜伏期均低于模型组(P <0.05);⑤结果表明:经鼻腔移植人脐带间充质干细胞修复新生大鼠缺氧缺血性脑损伤,可减少神经细胞凋亡,改善大鼠记忆学习能力。

• 单位
  深圳大学; 广东省妇幼保健院; 深圳市儿童医院