慢性高糖作用下小鼠骨骼肌成肌细胞对巨噬细胞极化的影响

作者：罗维; 艾磊; 王博发; 周越^*

来源：免疫学杂志, 2020, 36(11): 935-942.

DOI：10.13431/j.cnki.immunol.j.2020145

• 共培养
• 高糖
• 巨噬细胞极化
• RAW264.7
• C2C12

目的研究高糖环境下小鼠骨骼肌成肌细胞对巨噬细胞极化的影响。方法Transwell小室内共培养RAW264.7和C2C12细胞并给予高糖处理,相差显微镜观察RAW264.7细胞形态,共培养1 d和3 d后收集RAW264.7细胞及上清液,CCK-8检测RAW264.7细胞增殖能力,流式细胞术检测RAW264.7细胞表面F4/80、CD86和CD206阳性率,Western blot检测IL-1β、IL-10、iNOS和Arg-1蛋白表达,ELISA检测上清液IL-1β和IL-10分泌量。结果正常糖浓度下,C2C12与RAW264.7共培养1 d和3 d对RAW264.7细胞形态、细胞增殖无明显影响,促进RAW264.7活化为成熟巨噬细胞,提高CD206和F4/80双阳性率(P<0.01),促进IL-10和Arg-1蛋白表达增加(P<0.01),可促进IL-10分泌增加(P<0.01);高糖干预时,出现长梭形和多突形RAW264.7细胞,抑制细胞增殖(P<0.05),降低CD206和F4/80双阳性率并提高CD86和F4/80双阳性率(P<0.05),促进iNOS蛋白表达和IL-1β分泌,抑制IL-10蛋白表达和分泌(P<0.05);高糖作用下与C2C12共培养时,与共培养对照组和单独培养高糖组相比,出现较多长梭形和多突形RAW264.7细胞,且细胞体积变大,CD86和F4/80双阳性率增加(P<0.01),CD206和F4/80双阳性率降低(P<0.01),IL-1β蛋白表达和分泌增加(P<0.05),IL-10蛋白表达和分泌下降(P<0.05),Arg-1蛋白表达下降(P<0.05)。结论与C2C12共培养促进巨噬细胞M2型极化,但60 mmol/L葡萄糖作用下这一促进作用被逆转甚至进一步诱导巨噬细胞M1型极化。

• 单位
  南京体育学院; 江苏省体育科学研究所; 北京体育大学