低氧对人血管内皮细胞血管紧张素转换酶2表达影响的研究

作者：姜小飞; 陈玉成; 吴琴琴; 曾智

来源：四川大学学报（医学版）, 2010, 41(06): 951-954.

DOI：10.13464/j.scuxbyxb.2010.06.009

• 人脐静脉内皮细胞
• 血管紧张素转换酶2
• 低氧
• 免疫组织化学染色
• 实时荧光定量RT-PCR

目的观察低氧环境对人血管内皮细胞血管紧张素转换酶2(ACE2)表达的影响,并初步探讨其作用机制。方法人脐静脉内皮细胞株(HUVECs),进行贴壁细胞培养;采用免疫组织化学方法对细胞株进行Ⅷ因子鉴定;设立低氧实验组与常氧对照组。低氧组条件为1%O2+94%N2+5%CO2,常氧对照组的细胞置于5%CO2+95%空气孵箱内培养,37℃培养3h、6h、12h、24h,收集培养液和细胞;采用免疫组化鉴定ACE2蛋白合成情况,实时荧光定量RT-PCR检测ACE2mRNA表达水平。结果①与常氧组对照,低氧3h、6h、12h、24h组ACE2蛋白表达均有所下降(P均≤0.00625),其中低氧3h组的阳性率最低为14.53%,并且随时间延长呈现逐渐上升趋势;②与常氧对照组相比,低氧3h、6h、12h、24h组ACE2mRNA表达量均有所下降,其中低氧3h组ACE2mRNA相对表达率为0.281(P=0.031),低氧6h组为0.445(P=0.034),低氧12h组为0.794(P=0.434),低氧24h组为0.891(P=0.692)。结论在24h内,低氧使人血管内皮细胞ACE2蛋白的合成以及ACE2mRNA的表达减少,并且以3h最为明显,后出现逐渐升高趋势。这种先减少后增加的趋势,提示逐渐升高的ACE2对血管内皮缺氧损伤后的肾素血管紧张素系统(RAS)的反向调节有着重要作用。

• 单位
  珠海市人民医院; 四川大学华西医院