多房棘球绦虫TaqMan实时荧光定量PCR检测方法的建立及应用

作者：王冰洁; 赵莉; 班万里; 段兰利; 郭璐; 陈云英; 余婉蓉; 张壮志^*

来源：中国兽医学报, 2021, 41(12): 2421-2425.

DOI：10.16303/j.cnki.1005-4545.2021.12.19

• 多房棘球绦虫
• TaqMan探针
• 实时荧光定量PCR

为建立高效、特异的多房棘球绦虫(Echinococcus multilocularis,E.m)检测方法,本研究设计了1组基于E.m线粒体NADH脱氢酶亚基3(NADH3)基因的特异性引物和TaqMan探针,通过对反应体系及条件进行优化,建立了E.m荧光定量PCR检测方法。结果显示,该方法线性关系好,灵敏度高,在109～101 拷贝/μL相关系数达0.998,灵敏度达10拷贝/μL;在特异性试验中,与其他病原虫株无交叉反应,特异性较好;重复性试验(组间和组内)的变异系数均小于3%。应用建立的方法对采集的50份临床样品进行检测,发现9份为E.m感染阳性。由此可见,建立的荧光定量PCR方法可用于泡型包虫病(alveolar echinococcosis, AE)的快速检测、定量分析及流行病学调查。

• 单位
  新疆畜牧科学院; 新疆农业大学; 新疆畜牧科学院兽医研究所