SA11轮状病毒反向遗传学方法的初步应用

作者：刘夏飞; 李慧莹; 杜文静; 柴萨萨; 朱武洋; 段招军^*

来源：病毒学报, 2022, 38(04): 850-857.

DOI：10.13242/j.cnki.bingduxuebao.004161

• 轮状病毒
• 反向遗传学
• 重配

轮状病毒（Rotaviruses,RV）属于呼肠孤病毒科，是分十一节段的dsRNA病毒。直到2017年，轮状病毒才建立起完全基于质粒的反向遗传学系统。本文采用美国John T. Patton教授实验室报道的11+1质粒方法，尝试了基于SA11骨架质粒和我国流行株Hu05(G9P[8])VP4和VP7基因的重配。通过结合致细胞病变效应（Cytopathic effect,CPE）和RT-PCR结果验证，证明我们分别成功拯救出rSA11和重配Hu05 VP7的单基因重配毒株（rSA11-VP7Hu05）。进一步通过蚀斑试验和qRT-PCR方法，我们又比较了rSA11-VP7Hu05与亲本株rSA11和Hu05的滴度和基因组复制动力曲线。本文通过对SA11轮状病毒反向遗传方法应用于重配病毒拯救的初步探索，为我国开展下一代轮状病毒疫苗的开发奠定了技术基础。

• 单位
  甘肃中医药大学; 中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所; 基础医学院; 华北理工大学; 公共卫生学院