雄黄主要成分二硫化二砷对骨髓增生异常综合征SKM-1细胞的甲基化作用效应

作者：丁小燕; 王**; 张颖; 周庆兵^*

来源：中国实验方剂学杂志, 2022, 28(09): 66-71.

DOI：10.13422/j.cnki.syfjx.202201002

• 骨髓增生异常综合征
• 雄黄
• DNA甲基化
• 抑癌基因

目的：从DNA甲基化角度探讨雄黄主要成分二硫化二砷(As2S2)对骨髓增生异常综合征细胞株SKM-1细胞的效应机制。方法：细胞增殖与活性检测(CCK-8)试剂盒检测As2S2(0、1、2、4、8、16μmol·L-1)对SKM-1细胞的抑制作用；碘化丙啶(PI)染色法检测As2S2(0、1、2、4μmol·L-1)对SKM-1细胞周期的影响；运用人甲基化850K芯片在全基因组范围内观察As2S2(0、4μmol·L-1)对SKM-1细胞的甲基化效应并进行京都基因与基因组百科全书(KEGG)与基因本体(GO)分析；根据芯片数据，选取抑癌基因TUSC3，采用实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)与蛋白免疫印迹法(Western blot)技术观察As2S2(0、1、2、4μmol·L-1)对TUSC3 mRNA与蛋白的表达作用。结果：与空白组比较，As2S2对SKM-1细胞具有显著的抑制作用；增加G0/G1期细胞比例，降低S期细胞比例(P<0.05);850K芯片显示，4μmol·L-1As2S2能显著引起SKM-1细胞基因组的甲基化变化，共有12 710个差异甲基化基因(高甲基化与低甲基化基因各占50%),GO与KEGG数据库分析显示，差异甲基化基因涉及嘌呤代谢，自然杀伤细胞介导的增殖抑制作用，内吞作用，趋化因子信号通路，核泛素连接酶复合体等功能与通路；在下游基因表达方面，Real-time PCR与Western blot显示，与空白组比较，As2S2明显升高抑癌基因TUSC3的表达(P<0.05)。结论：雄黄主要成分As2S2对MDS细胞株SKM-1细胞具有显著的甲基化调控效应，并可能通过增加抑癌基因TUSC3的表达实现治疗效应。

• 单位
  中国中医科学院西苑医院