人凝血因子Ⅶ在CHO-K1细胞中的表达与鉴定

作者：肖薇; 赵睿; 李长清; 边国慧; 肖小璞; 林方昭

来源：中国生物制品学杂志, 2013, (06): 822-824.

DOI：10.13200/j.cjb.2013.06.83.xiaow.031

• 人凝血因子Ⅶ
• CHO-K1细胞
• 稳定转染
• 基因表达 Human coagulation factor Ⅶ(hFⅦ)
• CHO-K1 cells
• Stable transfection
• Gene expression

目的在CHO-K1细胞中表达人凝血因子Ⅶ(human coagulation factorⅦ,hFⅦ)。方法利用脂质体转染法,将表达质粒pcDNA3.1-FⅦ和空载体pcDNA3.1分别转染CHO-K1细胞,经900μg/ml G418筛选抗性细胞株。收集细胞培养上清,采用ELISA法检测细胞培养上清中rhFⅦ的水平;PT法检测细胞培养上清的凝血时间;Westernblot法检测细胞培养上清中rhFⅦ的表达。结果共获得3株抗性细胞,分别命名为CHO-FⅦ01～03,空载体转染的细胞命名为CHO-CK;CHO-FⅦ01～03细胞培养上清中均检测到了rhFⅦ,但含量均低于阳性对照;CHO-CK细胞...

• 单位
  中国医学科学院北京协和医学院