人β-珠蛋白核基质附着区介导表达载体稳定附着于中国仓鼠卵巢细胞

作者：吴向楠; 王天云; 杨瑞; 王俪; 王芳

来源：新乡医学院学报, 2013, (09): 695-699.

• 人β-珠蛋白
• 核基质附着区
• 附着质粒
• 中国仓鼠卵巢细胞 human β-globin
• matrix attachment region
• episomal vector
• Chinese hamster ovary cell

目的研究人β-珠蛋白核基质附着区是否能够介导表达载体稳定附着于中国仓鼠卵巢(CHO)细胞。方法人β-珠蛋白MAR序列克隆到pEGFP-C1构建重组质粒载体pEGFP-MAR,转染CHO细胞,使用Hirt裂解法提取细胞中附着体质粒,CaCl2法转化附着体质粒到宿主大肠杆菌DH5ɑ中,提取质粒,酶切,测序分析。结果还原质粒双酶切和单酶切结果均与转染前质粒酶切结果一致;测序分析得知还原质粒与转染前质粒中插入片段DNA序列相同。结论人β-珠蛋白MAR序列重组载体在CHO细胞中以附着体形式被完整还原出来。还原质粒酶切结果和测序结果均与转染前质粒一致。

• 单位
  新乡医学院