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摘要
建立一测多评高效液相色谱法同时测定五味子中五味子醇甲、五味子甲素、五味子乙素含量的方法，并验证该法的可行性和准确度。通过Plackett-Burman设计考察流动相中甲醇比例、流动相流量、柱温、进样体积对五味子醇甲色谱峰分离度的影响，确定流动相中甲醇比例、柱温为关键分析参数（P<0.05）。通过中心组合设计优化关键分析参数，建立色谱分析条件：以甲醇-水（体积比为70∶30）溶液作为流动相进行洗脱，流量为1.0 mL/min，柱温为35℃，检测波长为254 nm，进样体积为10μL。以五味子醇甲为内参物，分别建立五味子甲素、五味子乙素与五味子醇甲的相对校正因子，计算各成分含量，实现一测多评。采用外标法测定五味子甲素、五味子乙素含量，比较外标法的实测值与一测多评法预测值之间的差异，以验证一测多评法的准确度及可行性。五味子中五味子醇甲与五味子甲素、五味子乙素的相对校正因子分别为1.039、1.246。五味子醇甲、五味子甲素、五味子乙素色谱峰面积与质量浓度在5～500μg/mL范围内呈良好的线性关系，相关系数均大于0.999。样品加标回收率分别为100.1%、100.6%、100.3%，测定结果的相对标准偏差分别为1.6%、1.8%、1.1%(n=6)。分别采用一测多评法和外标法测定10批样品，测定结果基本一致。一测多评法可用于测定五味子中五味子醇甲、五味子甲素和五味子乙素的含量，方法准确。
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