大黄酸通过激活NRF2/HO-1信号通路改善 HK-2人肾小管上皮细胞纤维化的实验研究

作者：李玉婷; 王林群; 刘大伟; 陈嘉; 蔡红凯; 邹薇; 邹如政^*

来源：中药药理与临床, 2023, 39(11): 52-57.

DOI：10.13412/j.cnki.zyyl.20230712.002

• 大黄酸
• 人肾小管上皮细胞系
• 纤维化
• 转化生长因子-β1
• 核因子E2相关因子2/血红素氧合酶1信号通路

目的:探讨大黄酸在转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导的人肾小管上皮细胞系(HK-2)中的抗纤维化作用，并分析大黄酸对核因子E2相关因子2/血红素氧合酶1(NRF2/HO-1)信号通路的影响。方法:采用CCK-8法检测不同浓度大黄酸对人肾小管上皮细胞系HK-2增殖的影响，通过CCK-8结果选择无毒的10μmol/L和40μmol/L的大黄酸作为后续试验浓度；细胞设为空白对照组、模型对照组、大黄酸10、40μmol/L组，采用生化试剂盒检测细胞中丙二醛(MDA)含量及超氧化物歧化酶(SOD)活力；采用流式细胞仪检测细胞中活性氧(ROS)水平；采用Western blot法检测细胞中α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、上皮型钙粘素(E-cadherin)、转化生长因子β1(TGF-β1)、信号转导分子2/3(Smad2/3)、磷酸化Smad2/3(p-Smad2/3)、NRF2、HO-1、醌氧化还原酶1(NQO1)及核NRF2蛋白表达情况。结果:与正常对照组相比，模型对照组细胞中α-SMA、TGF-β1、Smad2/3、p-Smad2/3蛋白表达、MDA含量和ROS水平明显升高(P<0.05),E-cadherin、NRF2、HO-1、NQO1蛋白表达、核NRF2蛋白表达及SOD活力明显降低(P<0.05);与模型对照组相比，大黄酸40μmol/L组细胞中α-SMA、TGF-β1、Smad2/3、p-Smad2/3蛋白表达、MDA含量和ROS水平明显降低(P<0.05),E-cadherin、NRF2、HO-1、NQO1蛋白、核NRF2蛋白表达及SOD活力明显升高(P<0.05)。结论:大黄酸具有抗HK-2细胞纤维化作用，其作用机制可能与激活NRF2/HO-1信号通路，进而抗氧化应激有关。

• 单位
  湖北中医药大学; 襄阳市中医医院