胱天蛋白酶3在啮齿类动物和猕猴脑中的表达:种系和年龄相关研究(英文)

作者：张爱群; 高丽杰; 武艳; 赖惠玲

来源：中国临床康复, 2006, (26): 180-183+195.

• 蛋白酶类
• 脑
• 年龄因素

背景:有研究显示,凋亡相关蛋白酶—胱天蛋白酶3被认为是动物和人脑中细胞凋亡过程中的关键酶,正常人或阿尔茨海默病患者的脑中有该酶的表达,这与对成年啮齿动物脑研究的结果之间存在着矛盾。目的:揭示胱天蛋白酶3在啮齿类动物和猕猴脑中的表达有无差异,分析该酶在猕猴脑中的表达水平有无年龄差异,以及不同猕猴脑区间有无差别。设计:单变量均数的平行比较。单位:解放军总医院肝胆外科研究所,香港中文大学解剖学系。材料:实验于2003-08/2005-02在解放军总医院肝胆外科研究所及香港中文大学解剖学系进行的,所用的2,12,24和48周龄(每周龄组n=5)SD大鼠、ICR小鼠和快速衰老小鼠(senescence-acceleratedmice,SAM),雌雄不限,由香港中文大学实验动物服务中心提供;健康雌性4岁和20岁猕猴各4只,均购自解放军总医院医学实验动物中心(SCXK-(京)2003-002)。以上动物均在无任何实验干预的标准条件下养殖。方法:①所有脑组织标本均从猕猴和啮齿动物中新鲜切取,制成匀浆后通过免疫印迹法检测啮齿类动物和猕猴脑组织中胱天蛋白酶3蛋白的表达;②用同样的方法比较两个年龄组猕猴的大脑皮质、海马和小脑中该蛋白的表达量,并通过免疫组织化学法显示胱天蛋白酶3在猕猴3个脑区中的细胞分布状态。主要观察指标:①胱天蛋白酶3在啮齿类动物和猕猴脑中的免疫印迹检测;②胱天蛋白酶3在猕猴3个脑区中的细胞分布状态。结果:①免疫印迹检测结果:胱天蛋白酶3在3种2周龄的鼠脑中表达模式相同,在其它年长鼠脑中未检测到该酶;胱天蛋白酶3在成年和老年猕猴脑中均有持续表达,表达量低于2周龄鼠。胱天蛋白酶3在猴脑中以酶原(Mr32000)的形式存在,未发现该酶在猕猴脑中的表达量有年龄和脑区差异。②免疫组织化学法显示结果:猕猴大脑皮质胱天蛋白酶3的免疫反应性很低,海马的CA1、CA3和CA4区可见低至中度阳性染色的锥体细胞,小脑皮质的少数浦肯野氏细胞呈强阳性染色。老年猕猴除运动皮质第V层偶见呈强阳性染色的大锥体细胞外,其余与成年猴无明显差别。结论:啮齿类动物成年后,脑中胱天蛋白酶3的表达迅速下降至测不出,而该酶在成年及老年猕猴脑中仍维持在一定水平,其表达量和阳性细胞的分布状态无明显的年龄差异。

• 单位
  解放军总医院; 首都医科大学