摘要
目的:以人鼻咽癌CNE1细胞为研究对象,通过在培养液中添加不同浓度的半枝莲提取物(0.25, 0.5, 1 g·L~(-1)),来进一步探讨半枝莲提取物对鼻咽癌细胞周期阻滞的影响及其可能的分子作用机制。方法:半枝莲提取物处理CNE1细胞后,采用细胞计数试剂盒(CCK-8)法检测细胞增殖情况;吉姆萨(Giemsa)染色法检测克隆形成率;流式细胞术检测细胞周期分布;并且通过小干扰核糖核酸(siRNA)或者过表达的方式,以半定量反转录聚合酶链式反应(Semi-quantitative RT-PCR)和蛋白免疫印迹(Western blot,WB)法检测基因在转录和翻译水平的表达。结果:与空白组比较,半枝莲提取物处理组CNE1细胞的增殖和克隆形成率显著降低(P<0.05,P<0.01),呈剂量时间依赖性。与空白组比较,半枝莲提取物处理组细胞于合成前期(presynthetic gap0 period/ presynthetic gap1 period,G_(0)/G_(1))的百分率升高,较空白组有显著差异(P<0.05,P<0.01)。与空白组比较,半枝莲提取物处理组Skp2表达水平显著降低(P<0.01);与半枝莲提取物处理组比较,过表达Skp2 +半枝莲提取物处理组p21和p27蛋白水平显著降低(P<0.01)。与空白组比较,半枝莲提取物处理组CNE1细胞中STAT3信号的活化以及STAT3磷酸化水平的显著降低(P<0.05,P<0.01)。结论:半枝莲提取物能够有效抑制鼻咽癌细胞CNE1的增殖,其机制可能与其作用于STAT3/SKP2途径有关。
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单位河南省中医院; 第二临床医学院; 河南中医药大学