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摘要
目的:探讨Coronin 2A在骨肉瘤细胞生长中的调控作用。方法:采用免疫组化法检测正常骨和骨肉瘤组织中Coronin 2A蛋白的表达。采用qRT-PCR检测人骨肉瘤细胞U2OS、HOS和Saos-2中Coronin 2A mRNA的表达水平。取U2OS细胞分为2组,分别感染含Coronin 2A shRNA的慢病毒和含非特异shRNA的慢病毒(阴性对照),采用Western blot和qRT-PCR验证shRNA的干扰效率,采用MTT法和Brdu细胞增殖实验评估2组细胞生长和增殖能力,克隆形成实验评估细胞克隆形成能力,采用流式细胞术和Annexin V-APC染色法检测细胞周期和细胞凋亡。结果:骨肉瘤组织中Coronin 2A蛋白的高表达率高于正常骨组织(P=0.003)。骨肉瘤细胞系中,U2OS细胞Coronin 2A mRNA的表达水平最高。与阴性对照组比较,Coronin 2A shRNA慢病毒感染后U2OS细胞中Coronin 2A蛋白和mRNA的表达水平下调,细胞生长、增殖能力和克隆形成能力受抑,S期细胞减少,G1期、G2/M期细胞增多,凋亡率升高(P<0.05)。结论:Coronin 2A在骨肉瘤细胞生长过程中发挥重要的调控作用。
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