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摘要
本研究以波纹巴非蛤酶解液为研究对象,利用类蛋白反应的机理,通过添加外源氨基酸,以游离氨基酸减少量、DPPH自由基清除率、羟自由基清除率为指标,进行工艺条件优化,得到如下结果:(1)酶促修饰反应的最优蛋白酶为木瓜蛋白酶,最佳外源氨基酸为混合比为3∶7的半胱氨酸与赖氨酸。(2)底物浓度40%、p H 5.0、反应时间3 h、加酶量3 800 U/g、混合氨基酸添加总量0.56 g/g、反应温度34℃为最优反应条件。(3)以优化后的条件进行验证实验,得到游离氨基酸减少量为(24.05±0.24)mg/m L,DPPH自由基清除率为(90.24±0.46)%,羟自由基清除率为(50.44±0.07)%,与预测值基本吻合。(4)酶促胁迫修饰反应后产物的抗氧化活性显著提高,而HPSEC结果显示反应前后产物Mr<5 000 Da的占比并没有明显提升。研究结果表明,外源氨基酸酶促修饰可提高波纹巴非蛤酶解肽的抗氧化活性,具有一定的开发利用价值。
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