摘要
目的探讨低强度脉冲超声(low-intensity pulsed ultrasound,LIPUS)对体外原代培养的人骨性关节炎(osteoarthritis,OA)软骨细胞凋亡和细胞外基质(extracellular matrix,ECM)的影响。方法取人膝关节置换术后废弃软骨分离培养软骨细胞,经甲苯胺蓝染色与Ⅱ型胶原细胞免疫化学染色鉴定,分别用流式细胞仪、q PCR技术及Western blot技术检测不同超声强度(0、30、60、90 m W/cm2)条件下软骨细胞的凋亡率和Ⅱ型胶原(COL2α1)、蛋白聚糖(aggrecan)、基质金属酶13(matrix metalloproteases 13,MMP13)在mRNA及蛋白水平的表达差异。结果流式细胞学检测显示,30、60、90 m W/cm2组的细胞凋亡率[(7.75±0.79)%、(8.52±0.91)%、(11.38±0.85)%]均较对照组低[(18.13±0.83)%,P<0.05];30、60、90 m W/cm2组细胞的COL2α1和蛋白聚糖在mRNA及蛋白水平均高于对照组(P<0.05),MMP13 mRNA及蛋白表达水平低于对照组(P<0.05),但各处理组之间不呈强度依赖性。结论LIPUS能够抑制体外单层培养的OA软骨细胞的凋亡,促进软骨ECM的合成,抑制软骨ECM的分解,可用于OA的治疗并延缓其发展。
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