应用Super SMART cDNA合成技术扩增哮喘嗜酸性粒细胞总RNA

作者：赵海金; 蔡绍曦; 邹飞; 佟万成; 万为人

来源：第一军医大学学报, 2004, 24(09): 1037-1039.

DOI：10.3321/j.issn:1673-4254.2004.09.019

• SuperSMARTcDNA合成技术
• 支气管哮喘/病因
• 嗜酸性粒细胞 super smart cDNA synthesis technology
• bronchial asthma/pathogeny
• eosinophils

目的应用Super SMART cDNA 合成技术从嗜酸细胞微量总RNA扩增大量双链cDNA。方法利用Percoll密度梯度离心分离哮喘病人血嗜酸性粒细胞,用Trizol试剂盒提取细胞总RNA,利用Super SMART cDNA合成技术合成cDNA第1链及优化扩增第2链。通过梯度电泳鉴定cDNA产品质量,通过对获得的cDNA定量来评估扩增效能。结果从20 ng总RNA成功扩增出双链cDNA 7.155 μg,电泳结果显示cDNA质量及纯度较高。结论Super Smart cDNA 合成技术可实现从微量总RNA高效扩增高质量的cDNA,为进一步从基因水平研究哮喘机制奠定了基础。

• 单位
  南方医科大学; 第一军医大学南方医院